Biotecnologias Reprodutivas: Criopreservação, TE e FIV

Criopreservação

A criopreservação é um processo onde células ou tecidos biológicos são preservados através do congelamento a temperaturas muito baixas, geralmente a −196 °C.

Objetivo da Criopreservação

• Suspensão do metabolismo e manutenção das características biológicas por um longo período de tempo, mantendo a viabilidade celular.

Protocolos de Criopreservação

• Congelamento Lento:
  • Taxa de resfriamento entre 0,5 – 1,5°C/min (-80°C).
  • Duração de 3,5 a 4 horas.
  • Descongelamento é feito a 10°C/min.
• Congelamento Rápido:
  • Taxa de resfriamento entre 17 – 30°C/min (-30°C).
  • Duração de 2 a 2,5 horas.
  • Descongelamento é feito a 30°C/min.
• Congelamento Ultrarrápido e Vitrificação:
  • Congelamento a 250°C por minuto.
  • Duração do congelamento ficará entre 2 a 3 minutos.
  • Descongelamento > 300°C por minuto.

Etapas da Criopreservação

• 1) Adição de Agentes Crioprotetores;
• 2) Resfriamento, indução da formação de gelo e Congelamento;
• 3) Estocagem em Nitrogênio Líquido (-196°C);
• 4) Descongelamento;
• 5) Remoção das Soluções Crioprotetoras.

Marcadores Moleculares

• São variações na sequência de DNA, relacionadas à expressão de determinada característica específica funcional, não necessariamente correspondendo a um gene.

Vantagens dos Marcadores Moleculares:

• Não sofrem influência ambiental.
• Potencialmente ilimitados em número.

Desvantagens dos Marcadores Moleculares:

• Técnicas e equipamentos mais complexos.
• Onerosos.

Transferência de Embrião (TE)

Definição:

• Implantar em fêmeas receptoras embriões produzidos por fêmeas doadoras (0 até 30 embriões).

Etapas da TE:

• Estimulação hormonal – superovulação.
• Inseminação Artificial.
• Preparação das receptoras.
• Coleta e armazenamento de embriões (7 dias após IA).
• Transferência.
• Congelamento.

Vantagens da Transferência de Embrião (TE)

• Produzir um número maior de descendentes da fêmea de alto poder genético (até 20 bezerros/ano).
• MGA acelera o processo de seleção animal.
• Permite a utilização de fêmeas com distúrbios reprodutivos adquiridos, sem caráter genético.
• Possibilidade de congelar os embriões, criando um banco genético para preservação de raças.
• Bipartir os embriões: metades implantadas podem resultar em 50% de gestação ou 100% dos embriões originais.
• Facilidade para comercializar genética entre diferentes países ou regiões.

Limitações da Transferência de Embrião (TE)

• Impacto menor no melhoramento genético do que a Inseminação Artificial (IA).
• Tecnologia complexa e mais cara.
• Uso de mão de obra especializada.
• Hormônios podem alterar os ovários morfológica e fisiologicamente.
• Animais pré-púberes não podem ser trabalhados por essa técnica, ao contrário da PIVE.

Fertilização In Vitro (FIV)

Etapas da FIV:

• Preparo da doadora;
• Aspiração folicular;
• Seleção e cultivo dos oócitos;
• Preparo do sêmen;
• Fertilização dos oócitos;
• Clivagem;
• Cultivo dos embriões.

Vantagens da FIV:

• Produção de embriões de forma rápida, sem maior preparo da doadora.
• As doadoras não necessitam ser superovuladas.
• Produção de embriões a partir de animais pré-púberes, gestantes, senis e após a morte.

Desvantagens da FIV:

• Riscos de acidentes que possam ocasionar aderências.
• Custos elevados se comparados com embriões obtidos através da superovulação (até duas vezes mais).
• Baixo aproveitamento dos embriões submetidos à criopreservação.
• Impossibilidade de os embriões serem bipartidos.