Contagem e Controle de Microrganismos

Contagem Direta ao Microscópio

• Um volume conhecido de suspensão bacteriana é colocado em uma área definida da lâmina de microscópio.
• A amostra pode ser corada ou analisada a fresco.
• Câmaras de contagem

Desvantagens:

• Não diferencia células mortas e vivas.
• Podem ocorrer erros de contagem.
• Difícil contagem para bactérias móveis.

Filtração

• Se há um número baixo de bactérias, pode ser utilizado o método de filtração para a sua contagem.
• Concentração de bactérias sobre a superfície de uma membrana de filtro de poros muito pequenos após a passagem de um volume de 100 mL de água.
• O filtro é posteriormente transferido para uma placa de Petri contendo meio sólido.

Método do Número Mais Provável (NMP)

• Utilizado para microrganismos que não crescem bem em meio sólido.
• Diluição a partir de um alto volume de inóculo (ex. 10 mL).
• Diluição a partir de um médio volume de inóculo (ex. 1 mL).
• Diluição a partir de um baixo volume de inóculo (ex. 0,1 mL).
• Contagem do número de tubos positivos.
• Estimativa do número de células/mL de bactérias.

Turbidimetria

• Monitoramento do crescimento bacteriano através da turbidez.
• Espectrofotômetro (660 nm).

Atividade Metabólica

• A quantidade de um certo produto (como ácido ou CO2) é diretamente proporcional ao número de células bacterianas.

Peso Seco

• Principalmente para fungos filamentosos.
• O fungo é removido do meio por filtração.
• Seco em dessecador.
• Posterior pesagem.

Controle de População Microbiana

Calor Úmido

Fervura ou Fluxo de Vapor

• Ação: Desnaturação das proteínas.
• Mata os patógenos bacterianos vegetativos e fungos, e quase todos os vírus, dentro de 10 minutos. É menos efetivo em endosporos.
• Utilizado para esterilizar pratos, pias, jarras e equipamentos variados.

Autoclave

• Ação: Desnaturação de proteínas.
• Todas as células vegetativas e seus endosporos são mortos em cerca de 15 minutos quando são submetidos a 15 psi de pressão (121ºC).
• Utilizado para meios microbiológicos, soluções, forros, utensílios, curativos, equipamentos e outros itens que podem suportar temperatura e pressão.

Pasteurização

• Ação: Desnaturação de proteínas.
• Tratamento de calor utilizado no leite para matar todos os patógenos e quase todos os não patogênicos (72ºC por 15 segundos) e rápido resfriamento.

Calor Seco

Chama Direta

• Ação: Efeito de oxidação, queimando os contaminantes até se tornarem cinzas.
• Utilizado em alças de inoculação.

Incineração

• Ação: Efeito de oxidação, queimando até se tornarem cinzas.
• Utilizado em copos de papel e curativos contaminados.