Diagnóstico Laboratorial de Viroses

Mecanismos de Lesão Viral

Inibição da síntese de DNA, RNA ou proteínas.
Dano à membrana plasmática por proteínas virais.
Lise celular decorrente de replicação viral.
Lesão de células de defesa levando a infecções secundárias.
Indução à transformação maligna.

Imunopatologia

Muitas patologias causadas por vírus são, na realidade, consequência da resposta imune do hospedeiro.

• Na infecção pelo vírus da hepatite B, que não é lítico, as células infectadas são destruídas por células T CD8+, iniciando o quadro clínico = icterícia.
• Na miocardite por vírus coxsackie B, as perforinas produzidas por células T CD8 causam a lise celular.
• O mesmo vírus pode provocar uma variedade de doenças.
• A doença produzida não tem relação com a morfologia viral.
• A evolução de qualquer caso é determinada pela constituição genética do vírus e do hospedeiro.

Diagnóstico Laboratorial das Viroses

Introdução -> O diagnóstico de infecções virais é baseado em dois parâmetros:

• Isolamento e Identificação do vírus:
  • A colheita do material
  • O material deve ser transportado imediatamente para o laboratório, mantido em baixa temperatura (gelo), no entanto, sem congelar. As partículas virais apresentam instabilidade a fatores ambientais.
  • Quando o material for remetido para locais distantes, deve ser acondicionado em gelo seco.
• Propagação através de sistemas vivos (cultura de células, animais de laboratório)
• Detecção direta do vírus, antígenos e genomas virais (microscopia, testes imunológicos e biologia molecular).
• Sorologia: São utilizados métodos (indiretos) para detecção de anticorpos específicos, produzidos pelo hospedeiro em resposta à infecção viral.

Isolamento e Identificação do Vírus

Inoculação experimental de vírus em sistemas hospedeiros

• Propagação de vírus em animais de laboratório
• Propagação de vírus em ovos embrionados
• Propagação de vírus em culturas de células

Diagnóstico Imunológico das Infecções Virais (Detecção Direta e Sorologia)

Finalidades

• Diagnosticar uma enfermidade causada por vírus e a fase da infecção
• Identificar novos tipos de vírus isolados
• Estudar epidemiologicamente o comportamento de uma virose numa dada comunidade.

Reação de Hemaglutinação

Os vírus se ligam diretamente às hemácias formando agrupamentos visíveis.

Reação de Hemadsorção

Uma suspensão de hemácias é adicionada à cultura e estas irão se ligar às proteínas virais expressas na superfície das células infectadas.

Identificação do Vírus Isolado - Testes Imunológicos

Teste de neutralização, Teste de inibição da hemaglutinação, Teste de fixação de complemento, Imunofluorescência direta e indireta, Aglutinação passiva, Teste imunoenzimático, Immunoblotting.

Verificação da Propagação Viral

Fenômeno citopático, Microscopia eletrônica, Interferência viral, Reação de hemaglutinação viral, Reação de hemadsorção, Reações Imunológicas