Microbiologia Aplicada: Coloração de Gram e Lodos Ativados

1. O que é Coloração de Gram e Qual Sua Função?

É um método utilizado para a identificação de bactérias através de tratamento com agentes químicos. Serve para distinguir os tipos de microrganismos (Gram-positivos e Gram-negativos).

2. Descreva a Técnica da Coloração de Gram Passo a Passo.

1. Preparar um esfregaço bacteriano.
2. Cobrir o esfregaço com Violeta de Genciana e deixar atuar o corante durante 30 segundos.
3. Eliminar o excesso de corante.
4. Cobrir o esfregaço com o Soluto de Lugol e deixar atuar o mordente durante 30 segundos.
5. Rejeitar o excesso de mordente.
6. Inclinar a lâmina e deixar cair gota a gota o diferenciador Álcool-Acetona durante 5 a 10 segundos.
7. Lavar imediatamente com água destilada.
8. Cobrir o esfregaço com Fucsina de Ziehl diluída e deixar atuar o corante durante 10 segundos.
9. Eliminar o excesso de corante.
10. Lavar com água destilada e secar o excesso de água (com papel na parte de trás) e à chama muito rapidamente (para não partir).
11. Colocar uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço.
12. Observar ao microscópio com a objetiva de imersão (10X a 100x), tendo o cuidado de abrir o diafragma e subir o condensador.

3. Qual a Aplicabilidade do Corante de Contraste?

Este corante de contraste (geralmente Fucsina ou Safranina), de cor rosa, é aplicado para que, no final do processo, as bactérias que não retiveram o cristal violeta (as Gram-negativas) fiquem coradas de rosa, permitindo a distinção das Gram-positivas (que permanecem roxas).

4. Qual o Fator Predominante na Coloração de Gram?

O fator predominante é a natureza química da parede celular bacteriana. Células velhas ou que foram submetidas a processos físicos ou químicos podem ter sua integridade comprometida, alterando o resultado da coloração.

5. Quais os Grupos de Microrganismos Envolvidos nos Lodos Ativados?

• Aeróbios
• Anaeróbios

6. Descreva o Ciclo do Nitrogênio.

(Resposta não fornecida no documento original.)

7. Protozoários nos Lodos Ativados: Tipos e Papel no Tratamento.

Protozoários Envolvidos:

• Amebas
• Flagelados
• Ciliados livres e Natantes
• Ciliados fixos
• Ciliados predadores de flocos

Papel no Tratamento:

O papel mais importante desses organismos é a clarificação do sobrenadante. Eles se alimentam principalmente de bactérias livres e fragmentos de flocos, que causam turbidez porque não sedimentam adequadamente no decantador secundário.

8. Morfologia dos Flocos Microbianos e Causas da Desfloculação.

Morfologia dos Flocos:

Os flocos microbianos possuem uma estrutura firme e densa, resistente à ação cisalhante ou turbulência, o que contribui para a sedimentação adequada. A formação dos flocos ocorre naturalmente com o aumento do tempo de retenção, sendo iniciada pelas bactérias formadoras de flocos, que produzem componentes necessários (como grânulos de polissacarídeos: amido, glicogênio) que permitem a aglutinação.

Causas da Desfloculação:

A desfloculação é provocada por muita agitação das amostras ou pela morte das bactérias.

9. Bactérias Gram-Positivas e Gram-Negativas Comuns na Água.

• Gram-Positivas: Bacilos (ex: Bacillus subtilis)
• Gram-Negativas: E. coli (Escherichia coli)

10. O que é E. coli e Qual Técnica Analítica Foi Utilizada?

E. coli é uma bactéria Gram-negativa que se encontra normalmente no trato gastrointestinal inferior de organismos de sangue quente.

A técnica analítica utilizada no laboratório da FARO é a Coloração de Gram.

(Nota: A descrição passo a passo da técnica de Coloração de Gram encontra-se detalhada na Questão 2.)

11. O que são Enterococcus e Para Qual Programa Sua Avaliação é Utilizada?

Enterococcus são bactérias Gram-positivas, comensais do aparelho digestivo e urinário.

(Nota: A informação sobre o programa específico de avaliação não foi fornecida no documento original.)

12. Determinação de Bactérias Heterotróficas: Aplicação em Água e Efluentes.

A determinação de bactérias heterotróficas é realizada em tratamentos de água para consumo humano e em redes de efluentes domésticos.

13. Interpretação de Figuras (Microscopia de Lodo Ativado).

• Figura 1: Presença de Anelídeo N° 112.
• Figura 2: Lodo com boas características, onde se observam Ciliados livres e um Ciliado pedunculado. Outro lodo com boas características, onde se observa um Micrometazoário.