Revisão de Microbiologia: Vírus, Cultivo Celular e Bactérias

1. Efeito Citopático (ECP)

O efeito citopático é a denominação dada às alterações morfológicas observadas em células infectadas por vírus. Essas alterações resultam da inibição da síntese de ácidos nucleicos e proteínas celulares, fusão celular, liberação de enzimas do lisossomo, modificações na permeabilidade celular, alterações nas estruturas intracelulares e aberrações cromossômicas.

2. Cultivo Viral e Celular

O cultivo celular é dividido em duas etapas:

• Cultivo Primário: Realizado em tecidos de animais jovens ou órgãos fetais. O processo envolve tratamento com tripsina a 37°C por 30 minutos, centrifugação (3000 rpm/10 min) e incubação em estufa a 37°C com 5% de CO2.
• Cultivo Secundário: Inclui células secundárias, linhas celulares, linhagens celulares, células de linhagem e cultivo contínuo (células contínuas).

Sistemas de cultivo viral incluem: animais de laboratório, cultivos celulares, vírus citopatogênicos, vírus não citopagênicos e ovo embrionado.

3. Estrutura Viral

A estrutura que protege o ácido nucleico viral (DNA ou RNA) presente em virions de todas as famílias é o Capsídeo.

4. Ciclos Replicativos Virais

As etapas dos ciclos replicativos virais, em ordem cronológica, são:

1. Absorção (Entrada): Interação com receptores celulares.
2. Penetração: Ocorre por fusão ou endocitose.
3. Expressão Gênica: Envolve transcrição e tradução.
4. Replicação do Genoma: Síntese de DNA ou RNA (podendo ser segmentado).
5. Morfogênese e Egresso (Liberação): Ocorre por brotamento ou lise celular.

5. Local de Replicação Viral

A replicação dos vírus ocorre no núcleo ou citoplasma da célula.

Exemplo (Herpesvírus): O genoma, frequentemente associado à nucleoproteína, deve ser transportado através da membrana nuclear. Nas células infectadas com herpes, o capsídeo é transportado ao longo do citoesqueleto citoplasmático, do sítio de entrada até o poro nuclear. O DNA viral é então liberado no interior do núcleo, e o capsídeo vazio se desintegra. Ocorre a dissolução do envoltório proteico da partícula viral pela ação de enzimas celulares liberadas pelos lisossomos, expondo o ácido nucleico viral.

6. Resistência Estrutural dos Virions

A característica estrutural que oferece maior resistência aos virions no ambiente é a sua constituição por DNA ou RNA envolto pelo capsídeo de proteínas. O capsídeo constitui a forma infectiva do vírus. Cada família de vírus apresenta viriões com formatos distintos.

Estruturas de Adesão e Fatores de Virulência

• Fímbrias: Permitem a fixação em superfícies.
• Receptores ou Integrinas: Moléculas na superfície da célula hospedeira reconhecidas por determinado patógeno; a maioria são glicoproteínas.
• Adesinas ou Ligantes: Moléculas na superfície do patógeno capazes de reconhecer e se ligar a um receptor específico.
• Cápsulas: Possuem ação antifagocítica.
• Flagelos: Permitem o movimento de bactérias flageladas em locais aquosos do corpo, auxiliando na fuga da fagocitose.
• Capacidade de se multiplicar intracelular.
• Exoenzimas:
  • Necrosantes: Destruição de células e tecidos.
  • Coagulase: Liga-se à protrombina, produzindo coágulos.
  • Quinases (Fibrinolisinas): Efeito oposto à coagulase, dissolve coágulos.
  • Hialuronidase: Permite que os patógenos se espalhem no tecido conjuntivo.
  • Colagenase: Degrada o colágeno.
  • Lecitinase: Destruição das membranas celulares do hospedeiro.
  • Hemolisinas: Lisam eritrócitos.

7. Fatores de Virulência

Fatores de virulência são características fenotípicas que capacitam o microrganismo a causar doenças. Por exemplo, os flagelos permitem que as bactérias que os possuem cheguem a locais inacessíveis a outras devido à motilidade que fornecem. As fímbrias, por sua vez, permitem a fixação, aumentando a patogenicidade.

8. Endo e Exotoxinas

9. Agentes Bactericidas e Bacteriostáticos

Bactericidas: Eliminam as bactérias.

Bacteriostáticos: Inibem o crescimento das bactérias.

Sinergismo: Combinação de drogas que potencializa o efeito (ex: combinação de drogas bactericidas).

Antagonismo: Ocorre quando se combina um bactericida com um bacteriostático. O bacteriostático pode não conseguir inibir o crescimento, pois o bactericida reduz o número de bactérias, impedindo a ação do bacteriostático.

Correlação de Antibióticos

• Aminoglicosídeos (A): Inibem a síntese proteica (unidade 30S); bactericidas/bacteriostáticos.
• Betalactâmicos (B): Inibem a síntese da parede celular; bactericidas.
• Quinolonas (C): Interferem na DNA girase; bactericidas.
• Sulfas (D): Inibem o metabolismo do ácido fólico; bacteriostáticos.
• Macrolídeos (E): Inibem a síntese proteica (unidade 50S); bacteriostáticos/bactericidas.
• Polimixinas (F): Afetam a estrutura da membrana citoplasmática; bactericidas.

Resistência Bacteriana

• Motivos para o aparecimento: Uso descontrolado de antibióticos.
• Prevenção: Restringir o uso de antibióticos, prescrição apenas por médicos e uso de dosagens corretas.
• Tipos de resistência: Mutações cromossomais ou resistência adquirida por troca de material genético.
• Superbugs: Microrganismos resistentes a múltiplos fármacos.

Quórum Sensing: Processo de comunicação celular mediado pela densidade populacional.

Diferença entre Cinomose e Parvovirose

A Cinomose é uma doença altamente contagiosa provocada pelo Vírus da Cinomose Canina (VCC), da família *Paramyxoviridae*, que afeta cães e outros carnívoros. Ela degenera os envoltórios lipídicos (bainha de mielina) dos axônios dos neurônios, frequentemente levando a infecções bacterianas secundárias.

A Parvovirose é causada por um vírus da família *Parvoviridae*. É um DNA-vírus pequeno (18 a 26 nm), sem envelope lipoprotéico e com capsídeo de simetria icosaédrica. É muito resistente no ambiente (pH 3,0 a 9,0) e inativado acima de 56°C por 60 minutos. A transmissão ocorre pela via fecal-oral.

Postulados de Koch

Os postulados de Koch são:

1. Um microrganismo específico deve sempre estar associado a uma doença.
2. O microrganismo deve ser isolado e cultivado em cultura pura em condições laboratoriais.
3. A cultura pura do microrganismo produzirá a doença quando inoculada em animal suscetível.
4. É possível recuperar o microrganismo inoculado do animal infectado experimentalmente.

Diferença entre Bactéria e Vírus

Estrutura dos Fungos

Os fungos multicelulares são constituídos por uma rede de filamentos ramificados chamados hifas. Estas contêm citoplasma e núcleos e podem apresentar diferentes formas. As hifas formam uma rede densa de filamentos denominada micélio. Em muitos fungos, as hifas possuem septos que delimitam compartimentos celulares. O aspecto filamentoso do micélio confere grande superfície para absorção de nutrientes, estendendo-se rapidamente pela fonte de alimento. Por vezes, as hifas se organizam em corpos compactos, como nos cogumelos.

10. Microbiologia Bacteriana (Questões Múltipla Escolha e Respostas)

1. Gênero *Staphylococcus*

Alternativas corretas:

• b) O meio Manitol Salgado é seletivo para o gênero e diferencial para a espécie.

2. Toxinas Bacterianas

Alternativas corretas:

• a) As endotoxinas são componentes da parede celular.

3. Micobactérias

As micobactérias são conhecidas como Bactérias álcool-ácido resistentes, pois durante a coloração de Ziehl-Neelsen permanecem coradas após a lavagem com álcool-ácido.

4. Bacilos Gram-Negativos Não Esporogênicos

Exemplos de causadores de doenças em animais:

• Enterobacteriaceae: *Escherichia coli* e *Salmonella Pullorum*.
• Pasteurellaceae: *Pasteurella* e *Actinobacillus pleuropneumoniae*.

5. Meios de Cultura

Alternativa correta:

• c) O meio sólido citrato é azul após a inoculação nos casos positivos.

6. Características Bacterianas

Alternativa correta:

• a) *Nocardia* é uma bactéria filamentosa parcialmente álcool-ácido resistente.
• e) N.d.a (Considerando que as outras opções contêm incorreções, como *Clostridium* ser aeróbico ou a especificidade de patógenos).

7. Diferenciação *Staphylococcus* e *Streptococcus*

Os gêneros *Staphylococcus* e *Streptococcus* podem ser inicialmente diferenciados na coloração de Gram: o primeiro apresenta arranjo do tipo cacho de uva e o segundo arranjo do tipo corrente. A coloração não é definitiva, sendo recomendada a realização da prova de catalase, onde os *Streptococcus* são considerados catalase negativos.

8. Diagnóstico de Mastite Contagiosa (*S. agalactiae*)

Para diferenciar *Streptococcus agalactiae* de outras espécies causadoras de mastite (*S. uberis* e *S. dysgalactiae*):

1. Realizar a hidrólise da esculina: Se positivo, é *S. uberis*.
2. Se negativo, realizar o teste de CAMP: Positivo indica *S. agalactiae* (mastite contagiosa); Negativo indica *S. dysgalactiae*.

9. Actinomicose e Actinobacilose

A actinomicose e actinobacilose são causadas por actinomicetos, que eram confundidos por serem filamentosos (principal característica). A actinomicose é causada por *Actinomyces* e afeta o tecido ósseo.