Biologia dos Fungos: Morfologia, Classificação e Micoses

Biologia dos Fungos: Considerações Gerais

• O estudo dos fungos é chamado de Micologia.
• Os fungos podem desenvolver-se em meios de cultivo especiais, formando colônias de dois tipos: leveduriformes e filamentosos.

Leveduras

• São fungos unicelulares, esféricos ou ovais.
• Podem se multiplicar:
  1. Por fissão binária, produzindo duas células novas iguais; ou
  2. Por gemulação ou brotamento (protuberância em sua superfície externa), que se dividem formando células desiguais.
• Uma célula de levedura pode produzir mais de 24 células-filhas por brotamento.
• Algumas leveduras produzem brotos que não se separam uns dos outros; quando estes brotos formam uma pequena cadeia, esta é chamada de pseudo-hifas.
• Candida albicans se fixa às células na forma de levedura, mas é na forma de pseudo-hifas que invade os tecidos mais profundos.
• Crescem à temperatura de 37 °C, com aspecto de colônias bacterianas.

Fungos Filamentosos

• Sinonímia: bolores, orelha-de-pau, mofos, etc.
• Formados por filamentos denominados hifas.
• As hifas podem ser septadas ou asseptadas (cenocíticas).
• Mesmo nos fungos com hifas septadas, há aberturas nos septos que fazem com que o citoplasma de células adjacentes seja contíguo.
• As hifas crescem por alongamento das extremidades.
• Quando um fragmento de hifa é quebrado, este pode se alongar para formar uma nova hifa.
• A porção da hifa que obtém nutrientes é chamada de hifa vegetativa.
• A porção envolvida com a reprodução é a hifa reprodutiva ou aérea, que se projeta acima da superfície sobre a qual o fungo está crescendo e frequentemente sustenta os esporos reprodutivos.
• O conjunto de hifas é chamado de micélio.
• Crescem à temperatura ambiente (aproximadamente 25 °C).
• Podem se reproduzir assexuadamente ou sexuadamente.
• Tanto a reprodução sexual quanto a assexual ocorrem pela formação de esporos.
• Os esporos sexuais resultam da fusão de núcleos de tipos de cruzamento opostos de uma mesma espécie do fungo.
• Os fungos produzem esporos sexuais menos frequentemente que os esporos assexuais.
• Tipos de esporos assexuais:
  1. Conidiósporos: esporo unicelular ou multicelular que não é envolto em uma bolsa. São produzidos em cadeia na extremidade do conidióforo.
     • Artrósporo: formado pela fragmentação de uma hifa septada em células únicas, pequenas e levemente espessas.
     • Blastósporo: consiste em um broto originado de uma célula parental.
  2. Clamidósporo: esporo com paredes espessas, formado por arredondamento e alargamento no interior de um segmento de hifa.
  3. Esporangiósporo: formado dentro de um esporângio (bolsa) na extremidade de uma hifa aérea, chamada esporangióforo. O esporângio pode conter centenas de esporangiósporos.
• Esporos Sexuais:
  • Ascósporos: formam-se no interior de estruturas denominadas ascos. Os ascos podem estar contidos em corpos de frutificação, os ascocarpos. Três tipos de ascocarpos são conhecidos: cleistotécio, peritécio e apotécio.
    • Cleistotécio: estrutura globosa, fechada, com parede formada por hifas unidas, contendo um número indeterminado de ascos, cada um geralmente com oito ascósporos em seu interior.
    • Peritécio: estrutura piriforme com um poro por onde os ascos são eliminados.
    • Apotécio: ascocarpo aberto em forma de cálice.
  • Basidiósporos: originam-se no ápice de uma célula fértil chamada basídio. Esses propágulos são característicos dos denominados cogumelos (fungos macroscópicos).

Dimorfismo Fúngico

• Característica de alguns fungos patogênicos que exibem ambas as formas, leveduriforme e filamentosa, dependendo da temperatura a que são submetidos. A 37 °C, assume a forma de levedura e, a 25 °C, assume a forma de fungo filamentoso.

Características Nutricionais dos Fungos

• São quimio-heterotróficos.
• Crescem bem em pH 5,0.
• Quase todos são aeróbicos; algumas leveduras são anaeróbias facultativas.
• São muito resistentes à pressão osmótica, podendo sobreviver bem em altas concentrações de sal e açúcar.
• Podem crescer em substâncias com baixo grau de umidade.
• Necessitam de pouco nitrogênio.
• São capazes de metabolizar carboidratos complexos, como lignina (madeira).

Observação: Exceto em relação à quimio-heterotrofia, os fungos diferem das bactérias em todos os outros aspectos mencionados.

Divisões do Reino Fungi

1. Deuteromicota

   • Categoria não definitiva de fungos, pois neste grupo se enquadram aqueles que produzem apenas esporos assexuais, provavelmente porque ainda não se conseguiu demonstrar seus esporos sexuais. O brotamento também pode ocorrer.
   • Possuem hifas septadas.
   • Muitos fungos patogênicos são, ou uma vez foram, classificados como Deuteromicota.
   • Pneumocystis, patógeno oportunista em pacientes imunocomprometidos, foi primeiramente classificado como protozoário, mas estudos recentes de RNA ribossomal indicaram que estava mais relacionado com fungos, sendo classificado como Deuteromicota.

2. Zigomicota

   • Têm hifas cenocíticas.
   • Exemplo: Rhizopus nigricans, conhecido como mofo preto do pão.
   • Os esporos assexuais são esporangiósporos.
   • Os esporos sexuais são zigósporos (um esporo grande dentro de uma parede espessa). (Referência: TORTORA, PÁG 328, FIG 12.6 ABAIXO À ESQUERDA)

3. Ascomycota

   • Têm hifas septadas e algumas leveduras.
   • Seus esporos assexuais são normalmente conidiósporos produzidos a partir de um conidióforo.
   • Conídio significa pó.
   • Estes esporos são produzidos por uma estrutura em forma de saco conhecida como asco.

4. Basidiomycota

   • Possuem hifas septadas.
   • Este filo inclui fungos que produzem cogumelos.
   • Tem basidiósporos formados externamente em um pedestal chamado de basídio.

Micoses Superficiais (Dermatofitoses)

Geralmente, os agentes etiológicos são os dermatófitos abaixo:

• Epidermophyton
• Microsporum
• Trichophyton

Infectam somente tecidos superficiais queratinizados, particularmente pele, pelo e unhas, mas não invadem os tecidos mais profundos nem tendem a disseminar-se.

Epidermophyton

• Formam colônias aveludadas ou pulverulentas de cor amarelo-amarronzada.
• Não atingem o cabelo; apenas pele e pelo.

Microsporum

• A cor das colônias varia do branco ao marrom.
• Atinge cabelo, pele e raramente unhas.

Trichophyton

• Formam colônias pulverulentas, aveludadas ou cerosas com pigmentação variada, que vai do branco, róseo, vermelho e púrpura até amarelo e marrom.
• Invadem cabelo, pele e unhas.

Aspectos Clínicos das Micoses Superficiais

1. Tinea Negra Palmar e Pedis

   • Agente etiológico: Exophiala werneckii.
   • É um fungo dimórfico.

2. Tinea Pedis (Pé de Atleta)

   Há prurido e aparecimento de vesículas que se rompem com saída de líquido claro. A pele dos espaços interdigitais torna-se macerada e se rompe, aparecendo fissuras, o que predispõe à infecção secundária por bactérias.

3. Tinea Corporis (Impigem)

   Tinea da pele glabra (sem pelos) que causa lesões com zona central clara e escamosa, rodeada por bordo elevado e eritematoso.

4. Tinea Capitis (Tinea do Couro Cabeludo)

   Ocorre na infância e cura espontaneamente na adolescência, o que provavelmente está relacionado à elaboração, na vida adulta, de ácidos graxos superiores que são fungistáticos.

5. Pitiríase Versicolor (Pano Branco)

   • O agente etiológico é a Malassezia furfur.
   • Produz lesões descamativas de cor parda ou cinza.

6. Piedra Preta

   • Localiza-se nos cabelos, produzindo nódulos duros, de coloração escura.
   • Agente etiológico: Piedraia hortae.

7. Piedra Branca

   • Apresenta lesões nodulares claras (branco-amareladas) e se localizam nos pelos de rosto, pescoço e geralmente nas extremidades do pelo.
   • Agente etiológico: Trichosporon beigelii.

8. Candidíase

   É uma das micoses superficiais de maior importância devido à alta frequência de quadros clínicos na população, principalmente pelo fato de ser uma doença oportunista. É uma doença cosmopolita.

   Fontes de Infecção:

   • Endógena (mais comum)
   • Exógena: ar, alimentos, ambiente em geral

   A Candida albicans é o agente etiológico mais frequente; é um fungo leveduriforme, portanto, unicelular e se reproduz normalmente por gemulação.

   Outras espécies de Candida também podem causar candidíase, tais como:

   • Candida tropicalis
   • Candida stellatoidea
   • Candida krusei
   • Candida parakrusei

   Aspectos Clínicos:

   • Candidíase das Mucosas:
     • Boca (vulgarmente conhecida como sapinho), podendo se estender até a língua.
     • Cantos da boca (queilite).
     • Mucosa vaginal (vulvovaginite).
     • Pênis (balanopostite).
   • Candidíase Cutânea:
     • Da unha. Pode ser paroníquia (nos cantos da unha) ou oníquia (na unha propriamente dita, aparecem ondulações e fragmentação).
     • Espaços intertriginosos ou intertrigo (virilha, axila, dobras, etc.).
     • Perianal.
   • Candidíase Generalizada:
     • Candidíase pulmonar, etc.

Micoses Subcutâneas

• Cromomicose
• Esporotricose
• Micetomas
• Feohifomicose

Micoses Profundas

1. Cryptococcus neoformans

   • É um fungo leveduriforme, gemulante, que possui uma grande cápsula.
   • Vive livremente no solo e é encontrado com frequência em fezes de pombo.
   • No homem, a infecção pulmonar primária é ocasionalmente seguida por meningite.

2. Histoplasma capsulatum

   • É um fungo dimórfico que causa a histoplasmose.
   • Pode desencadear pneumonia no homem.

3. Outras Micoses Profundas:

   • Paracoccidioidomicose
   • Lobomicose
   • Blastomicose Norte-Americana
   • Coccidioidomicose

Diagnóstico Laboratorial de Micoses

1. Colheita das Amostras

   A partir de Fontes Cutâneas:

   • Passar no local algodão embebido com álcool a 70% para remover bactérias contaminantes.
   • Em lesões aneliformes típicas, colher da borda eritematosa de desenvolvimento periférico: raspar com bisturi ou com lâmina de microscopia (das bordas).
   • Recolher os fragmentos em placa de Petri ou envelopes de papel.

   Unhas Infectadas:

   • Colher por baixo. Se não for possível, raspar a superfície com lâmina para obter material das partes mais profundas, onde é provável encontrar microrganismos infectantes.

2. Processamento

   Exame Direto:

   • Exame direto para amostras densas e opacas (escamas de pele, raspados de unhas e pelos).
   • Emulsionar em uma gota de KOH sobre lâmina de vidro. Para escarro, secreções e pele, KOH a 10-20%. Para unha: 30-40%.
   • Aquecer a mistura sobre chama de bico de Bunsen, examinar após 10-15 minutos (tempo para clarear o esfregaço).
   • Função do KOH: dissolve a queratina e intensifica o contraste das estruturas fúngicas com outros materiais presentes, além de desengordurar.

3. Meios de Cultura

   Meios Não Seletivos:

   • Permite o crescimento de virtualmente todas as espécies fúngicas, como o Ágar Sabouraud Glicose.
   • Esse meio tem baixo pH, o que inibe o desenvolvimento de muitas bactérias contaminantes que podem estar presentes na amostra.
   • Pode ser realizada uma modificação no Ágar Sabouraud, na qual o conteúdo de glicose é reduzido de 4 para 2 e o pH ajustado para 6,9. Esta modificação intensifica a esporulação e é particularmente útil para o subcultivo de fungos cuja identificação pode ser difícil devido ao escasso desenvolvimento das estruturas de frutificação características.

   Composição tradicional do Ágar Sabouraud:

   • Ágar Sabouraud Glicose
   • Dextrose (glicose) - 40g
   • Peptona - 10g
   • Ágar - 15g
   • Água destilada - 1L
   • pH = 5,6

   Meios Seletivos:

   • Adiciona-se antibiótico (penicilina - 20 U/mL, estreptomicina - 40 U/mL, gentamicina - 5 µg/mL, cloranfenicol - 16 µL/mL) a um meio basal não seletivo, a fim de inibir a contaminação bacteriana.
   • Adição de cicloheximida (Actidione): 0,5 mg/mL, para impedir o crescimento de alguns bolores de crescimento mais rápido, que contaminam os meios. Porém, alguns fungos patogênicos como C. neoformans e A. fumigatus podem ser parcial ou totalmente inibidos pela cicloheximida.