Biotécnicas de Reprodução Animal e Criopreservação

1. As biotécnicas da reprodução animal são ferramentas singulares para o avanço tecnológico da pecuária nacional, pois possibilitam a expansão e seleção do material genético adequado para o melhoramento animal. Dentre essas biotécnicas, destaca-se a criopreservação de embriões, cujo sucesso depende de diversos fatores. Cite 5 fatores que afetam o sucesso da criopreservação de embriões.

Resposta: Qualidade dos embriões, formação de cristais, oscilação de temperatura, taxa de sobrevivência pós-descongelação, manejo e experiência do profissional, e condições de armazenamento.

2. A maturação oocitária consiste em uma etapa crucial e limitante para a produção de embriões in vitro, uma vez que o potencial de desenvolvimento oocitário e embrionário está diretamente relacionado à adequada maturação citoplasmática e nuclear. Quais parâmetros são utilizados para a avaliação das células do cumulus oophorus e do citoplasma do oócito após a maturação oocitária?

Resposta: Citoplasma homogêneo, várias camadas celulares e células compactas.

3. A clonagem é um mecanismo comum de propagação da espécie em plantas ou bactérias. De acordo com Webber (1903), um clone é definido como uma população de moléculas, células ou organismos que se originaram de uma única célula e que são idênticas à célula original e entre elas. Em humanos, os clones naturais são os gêmeos idênticos, que se originam da divisão de um óvulo fertilizado. A grande revolução da Dolly, que abriu caminho para a possibilidade de clonagem humana, foi a demonstração, pela primeira vez, de que era possível clonar um mamífero, isto é, produzir uma cópia geneticamente idêntica a partir de uma célula somática diferenciada. (ZATZ, M. Clonagem e células-tronco. Estudos Avançados, v. 18, n. 51, p. 247-256, 2004). Sobre os princípios básicos de clonagem, é correto afirmar que:

Alternativa correta: e) A grande novidade sobre a clonagem da ovelha Dolly foi a descoberta de que uma célula do corpo, diferenciada, poderia ser reprogramada ao estágio inicial e voltar a ser totipotente.

4. A técnica de clonagem está bastante difundida no mundo. No Brasil, diversos centros de pesquisa vêm trabalhando com a técnica, focando principalmente na produção de bovinos. As justificativas para a produção de clones de bovinos são principalmente a preservação e a gestão genética de indivíduos de importância econômica. Para que um clone bovino seja produzido, faz-se necessária:

Alternativa correta: c) A inserção do núcleo de uma célula somática do bovino que se deseja clonar em um oócito anucleado de uma fêmea de mesma espécie, e posterior colocação no útero de uma fêmea, a qual gestará o clone.

5. Considerando os aspectos relacionados à técnica de produção in vitro de embriões, julgue as assertivas abaixo como verdadeiras (V) ou falsas (F):

• I. In vitro, a capacitação dos espermatozoides é promovida pelo ácido acético.
• II. O cocultivo de espermatozoides e oócitos para que haja a fecundação é realizado por um período médio de 18h, em meio contendo agentes capacitores.
• III. O soro fetal bovino é utilizado como suprimento do meio de cultivo somente em casos em que os oócitos utilizados não sejam de boa qualidade.
• IV. Antibióticos são substâncias adicionadas aos meios de cultivo para evitar contaminações bacterianas.
• V. A taxa de blastocistos geralmente é avaliada no 7º dia após a fecundação, sendo que os blastocistos podem permanecer na estufa até o 9º dia para que seja avaliada a taxa de eclosão.

Após julgar as alternativas acima, marque a opção correta:

Alternativa correta: d) Apenas as alternativas II, IV e V estão corretas.

6. A possibilidade de se obter boas taxas de concepção após a inseminação artificial utilizando sêmen congelado foi um dos principais fatores responsáveis pela disseminação da inseminação artificial em todo o mundo. Esta biotecnologia favorece o trânsito de germoplasma entre países e regiões, com custos inferiores ao transporte de animais vivos, além de manter viáveis as amostras congeladas de sêmen por tempo indeterminado. Todavia, diversas etapas precedem a congelação de amostras seminais, incluindo o exame andrológico e o processamento do sêmen, de forma a aumentar o índice de sobrevivência dos espermatozoides após a descongelação. Sobre esse tema, qual é a alternativa CORRETA?

Alternativa correta: a) Durante todas as etapas do processo de congelação, um dos cuidados imprescindíveis é a não ocorrência de choque térmico, pois esse evento é capaz de induzir danos à membrana espermática, reduzindo sua viabilidade.

7. No Brasil, a produção in vitro de embriões na espécie bovina é, atualmente, a maior do mundo. Considerando-se as técnicas e limitações da produção in vitro de embriões, qual alternativa descreve corretamente o processo de coleta de oócitos em vacas vivas adotado em larga escala por empresas comerciais no Brasil?

Alternativa correta: d) A aspiração dos folículos antrais geralmente é feita guiada por ultrassom, utilizando-se transdutores microconvexos.

8. O exame clínico especial de touros reprodutores envolve etapas como inspeção e palpação testicular, dos epidídimos, do pênis, dos órgãos sexuais acessórios e, ainda, uma avaliação da libido. Contudo, a avaliação da qualidade seminal ainda é a parte mais importante do exame andrológico do macho, devendo ser feita com uma amostra fresca. Considerando as afirmativas quanto às características de qualidade de sêmen que podem ser avaliadas no exame andrológico de rotina, verifica-se que está(ão) correta(s):

• I. Volume, cor e consistência.
• II. Motilidade geral e progressiva.
• III. Avaliação morfológica dos espermatozoides.
• IV. Exame bacteriológico do sêmen.

Alternativa correta: c) I, II e III apenas.

9. A criopreservação é uma técnica de preservação de células e tecidos biológicos, como espermatozoides, oócitos e embriões. Para otimizar a sobrevivência das células ao processo de criopreservação, são utilizadas substâncias crioprotetoras. Sobre crioprotetores, assinale a alternativa INCORRETA.

Alternativa incorreta: A característica mais importante e que deve ser considerada para os crioprotetores refere-se à sua toxicidade, pois esta característica limita a concentração em que este pode ser utilizado antes do resfriamento. Com relação à produção de injúrias, como, por exemplo, a lesão das membranas, os crioprotetores não interferem, sendo o método de criopreservação diretamente responsável por este aspecto.

10. A criopreservação de embriões é uma técnica complementar às biotécnicas de produção in vivo ou in vitro de embriões, que permite "armazenar" os embriões produzidos para que sejam posteriormente transferidos a uma doadora sincronizada. Sobre os métodos de criopreservação de embriões, analise as afirmativas a seguir:

• I. Estão disponíveis diversas técnicas e protocolos de criopreservação, para as quais encontramos variações no tipo de crioprotetor e velocidade de resfriamento.
• II. Todos os protocolos de criopreservação têm como objetivo final a prevenção da formação de cristais de gelo dentro das células, condição incompatível com os sistemas biológicos.
• III. O processo de criopreservação envolve basicamente as etapas: adição do crioprotetor, envase, resfriamento, congelamento ou vitrificação, descongelamento ou aquecimento; e, quando necessário, remoção ou diluição do crioprotetor.

Alternativa correta: d) Todas as afirmativas estão corretas.

11. "Fertilização in vitro, conhecida pela sigla FIV, consiste basicamente na fecundação dos oócitos colhidos de doadoras pré-selecionadas dentro de um laboratório." Descreva resumidamente os procedimentos que acontecem durante esse processo e a duração dessa etapa.

Resposta:

• Estimulação ovariana;
• Coleta de oócitos;
• Seleção, preparação e separação dos espermatozoides viáveis;
• Fertilização (aproximadamente 100.000 espermatozoides por microgota) — duração de 12 a 18 horas;
• Cultivo de embriões;
• Transferência de embriões.

12. As biotécnicas da reprodução animal são ferramentas singulares para o avanço tecnológico da pecuária nacional, pois possibilitam a expansão e seleção do material genético adequado para o melhoramento animal. Dentre essas biotécnicas, destaca-se a criopreservação de embriões, cujo sucesso depende de diversos fatores. Quais características desejáveis dos embriões selecionados para a criopreservação, quanto ao estágio de desenvolvimento e à qualidade embrionária?

Resposta:

• Estágio de desenvolvimento: Embriões em estágio de blastocisto são mais adequados para a criopreservação devido à maior taxa de sobrevivência pós-descongelamento.
• Qualidade embrionária: Embriões de alta qualidade, com boa morfologia e desenvolvimento normal, são mais indicados para a criopreservação.

Nota: É essencial selecionar embriões de boa qualidade e em estágio avançado de desenvolvimento para garantir o sucesso do processo de criopreservação.