Cromatografia

1-Explique sobre a eficiência de uma coluna empacotada em relação ao tamanho das partículas. Como seriam as curvas (van Deemter)?

R: A diminuição do tamanho das partículas (fase estacionária) diminui a altura dos pratos e o tempo de retenção, aumentando o número de pratos, a pressão e a resolução por fim.

O aumento do tamanho das partículas (fase estacionária) aumenta a altura dos pratos e o tempo de retenção, diminuindo o número de pratos, a pressão e a resolução por fim.

Uma razão pela quais partículas pequenas propiciam melhor resolução é que elas provem uma vazão mais uniforme através da coluna, e a segunda razão é que a distância da qual o soluto tem que se difundir na fase móvel entre as partículas é da ordem de grandeza do tamanho da partícula.

2-Eluição Isocrática e por Gradiente?

R: a) A eluição isocrática é feita com um único solvente (ou com uma mistura de solventes de composição constante). A eluição por gradiente é realizada quando se utiliza uma quantidade de solvente B a uma quantidade de solvente A para aumentar a força eluente (variação da concentração dos solventes durante a análise).

b)A eluição por gradiente pode diminuir o tempo de análise.

c)Eluição por gradiente é utilizada para se alterar a força eluente.

3-Pergunta referente á coluna e a fase estacionária, quanto à sua resistência.

R: Ser resistente significa não prejudicar sua análise no sentido de não degradar a coluna nem a fase estacionária com possíveis alterações de pH, temperatura, passagem e/ou troca de solventes diferentes, se ocorrer essas mudanças e a separação for resistente, conseqüentemente, manterá a boa resolução e manterá um resultado confiável em sua análise e alta reprodutibilidade.

4-Pergunta referente à alça de amostragem (injeção de amostra)

R: a) Amostra deve ser injetada com a alça para descarte, então ocorre a limpeza e o carregamento de um volume definido e com ela a fase móvel, juntas circulam pela coluna.

b)Ao girar, alinhar-se a alça para a coluna e a amostra, e a amostra será arrastada pela fase móvel, que também está alinhada e então realiza-se(começa) a análise.

5-Explique como medimos o valor de k (não está bem formulada)

R: (a)k´=Tr-tm/tm

Terá que ser menor para diminuir a força eluente da fase móvel e aumentar a interação do analito com a fase estacionária e conseqüentemente os tempos de retenção.

b) Terá que ser maior para diminuir a força eluente da fase móvel e aumentar a interação do analito com a fase estacionária e conseqüentemente os tempos de retenção.

Atributos de uma boa separação: * 0,5 < k > 20 * resolução >2 * pressão de operação < 15MPa * 0,9 < fator de assimetria < 1,5

6-Quais seriam as composições dos solventes?

R: A= 90% acetonitrila / 10% tampão
B= 60% metanol / 40% tampão
C = 45% tetraidrofurano / 55% tampão
D= 45% acetonitrila / 30% metanol / 25% tampão
E = 45% acetonitrila / 23% tetraidrofurano / 32% tampão
F= 30% metanol / 23% tetraidrofurano / 47% tampão
G= 30% acetonitrila / 20% metanol / 15% tetraidrofurano / 35% tampão