Guia Completo sobre Marcadores Moleculares e Genéticos

O que são Marcadores Moleculares?

Qualquer característica morfológica ou molecular que diferencia indivíduos e que seja facilmente detectável.

Tipos de Marcadores

• Morfológicos
• Bioquímicos
• Moleculares

Características Desejáveis

• Alto polimorfismo
• Reprodutibilidade
• Amplamente distribuído através do genoma
• Baixa influência ambiental
• Custo acessível e fácil de mensurar

Definição Técnica

Pequena região do DNA que mostra polimorfismo de sequência em diferentes indivíduos de uma mesma espécie ou grupos de indivíduos. Podem ser detectados tanto em regiões codificadoras como não codificadoras do DNA, no núcleo ou em organelas.

Análise de Marcadores: RFLP e RAPD

RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)

• Vantagens: Expressão codominante, análise de qualquer parte do organismo ou estádio de desenvolvimento, resultados altamente estáveis e reproduzíveis.
• Desvantagens: Processo caro e laborioso, inexistência de biblioteca de sondas para algumas espécies.

RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)

• Vantagens: Quantidade mínima de DNA, elimina a necessidade de conhecimento prévio.
• Desvantagens: Expressão dominante, baixa reprodutibilidade.

Aplicações dos Marcadores Genéticos

• Identificação e descrição de genótipos;
• Quantificação de variabilidade genética e correlação com a expressão fenotípica;
• Identificação de origem parental e testes de paternidade;
• Identificação e proteção de cultivares (fingerprint);
• Avaliação de linhagens e previsão de produtividade de híbridos;
• Alocação de linhagens em grupos heteróticos;
• Certificação de pureza genética;
• Estimativa de alogamia e autofecundação;
• Monitoramento de cruzamentos.

Extração de DNA

A extração do DNA é o primeiro passo para técnicas de genética molecular, variando conforme o tecido e a espécie. De modo geral, utiliza-se:

• Tampão: Para estabilizar o pH;
• Sal: Para dissociar as proteínas;
• Detergente: Para solubilizar as membranas;
• Agente inativador: Para neutralizar proteínas que degradam o DNA.