Guia de Microbiologia: Enterobactérias e Meios de Cultura

O que são anaeróbios facultativos? São aqueles que crescem tanto na ausência como na presença de O₂.

O que são bastonetes? São bacilos Gram-negativos, não formadores de esporos e que produzem endotoxinas.

Onde são encontradas as enterobactérias, quais os gêneros mais comuns, as que causam doenças e qual sua função? São amplamente distribuídas no solo, água e tecidos gastrointestinais de homens e animais. Os gêneros entéricos são: Escherichia, Salmonella, Shigella, Enterobacter, Serratia, Yersinia, Proteus, Providencia, Edwardsiella, Klebsiella, Arizona, Citrobacter e Hafnia. As principais causadoras de doenças são Salmonella, Enterobacter, Serratia, entre outras. São bactérias fermentadoras de glicose, não resistem à luz solar, dessecação, pasteurização e desinfetantes comuns; sobrevivem vários meses em ambientes úmidos. As enterobactérias produzem plasmídeos de resistência que desenvolvem resistência a microrganismos.

Onde é encontrado o gênero Escherichia? Está presente na flora intestinal de homens e animais.

Sobre a E. coli, defina:

• A) E. coli enteropatogênica clássica (EPEC): É a que causa lesão nos enterócitos; ela muda o metabolismo e causa diarreia acompanhada de sangue. Pela lesão, outros microrganismos podem passar e causar doenças.
• B) E. coli enterotoxigênica (ETEC): É tóxica e produz toxinas no intestino. Causa doenças por ação de toxinas que atuam nos enterócitos.
• C) E. coli enteroinvasiva (EIEC): Pode invadir tanto o intestino como outros órgãos e causar enfermidade sistêmica.
• D) E. coli entero-hemorrágica (EHEC): Causa disenteria grave em animais adultos; pela perda de sangue, provoca edema em suínos.
• E) E. coli enteroagregativa (EAEC): Categoria ainda pouco caracterizada.

Qual a diferença entre bastonetes Gram-negativos e Gram-positivos? Os Gram-negativos não formam esporos e são, em sua maioria, enterobactérias. Já os Gram-positivos são formadores de esporos. Eles podem ser diferenciados pela série bioquímica.

Fale sobre o meio de cultura OF (Glicose): É um meio semissólido, possui cor verde e não é inclinado. É responsável por realizar a oxidação e fermentação da glicose. Se o microrganismo degradar o açúcar, o meio muda para a cor amarela; se não, permanece da mesma cor.

O que é TSI e qual sua função? Triple Sugar Iron é um meio que apresenta três açúcares (lactose, sacarose e glicose). É sólido e apresenta cor vermelho-alaranjada. Se degradar apenas a glicose, fica amarelo na base do tubo; se degradar a lactose e a sacarose, fica amarelo no ápice (rampa). Se apresentar uma cor escura, é porque houve a produção de gás sulfídrico (H₂S).

Fale sobre o meio SIM: É um meio semissólido não inclinado, utilizado para verificar a motilidade, produção de indol e H₂S. Possui coloração amarelada. Na motilidade, observa-se o crescimento além da linha de inoculação. Na degradação do triptofano, percebe-se a detecção do indol através do reagente de Kovacs, formando um halo vermelho.

Fale sobre Citrato e Ureia:

• Citrato: Meio sólido de cor verde. Se o citrato for utilizado como única fonte de carbono, o meio muda para a cor azul.
• Ureia: É um meio inclinado que pode ser sólido ou líquido. Se o microrganismo degradar a ureia (presença de urease), ele passa de amarelo para rosa choque; se não, permanece da mesma cor.

O que é VM-VP e qual sua função?

• VM (Vermelho de Metila): Ocorre a inoculação em um meio líquido. Após a incubação, acrescenta-se o indicador vermelho de metila. Se o resultado for positivo (fermentação ácida), fica vermelho; se for negativo, fica amarelo/laranja. Geralmente, microrganismos VM positivos são VP negativos.
• VP (Voges-Proskauer): Indica a produção de acetoína (via butanodiólica). Ao adicionarmos hidróxido de potássio e alfa-naftol, a formação de um anel vermelho indica resultado positivo.

Fale sobre actinomicetos: São bactérias filamentosas, bacilos Gram-positivos que podem apresentar formato de cocos em cadeia. São telúricas (vivem na terra) e patógenos oportunistas. Seus principais gêneros são Nocardia, Actinomyces, Arcanobacterium e Dermatophilus congolensis.

Fale sobre:

• Actinomyces: Apresenta espécies como A. bovis e A. viscosus, sendo o bovis o mais importante. Localiza-se na flora normal da cavidade oral, gastrointestinal e urogenital. Provoca doenças como actinomicose bovina/canina, pústula cutânea e mastite. São anaeróbios facultativos, Gram-positivos e imóveis.
• Nocardia: Encontra-se amplamente distribuída na natureza. É parcialmente álcool-ácido resistente (BAAR), o que dificulta a ação de antibióticos. Apresenta ácido micólico, forma granulomas, é Gram-positiva, ramificada, longa e fina, atuando como patógeno oportunista.
• Actinobacillus: Bactérias Gram-negativas, anaeróbias facultativas e comensais de membranas mucosas. Ataca tecidos moles, como a língua (causando a "língua de pau").

Fale sobre as micobactérias: A maioria é saprófita do solo e poucas causam doenças. São bacilos delgados, imóveis, fracamente Gram-positivos, com parede celular atípica e rica em lipídeos, sendo classificados como bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR).

Fale sobre Mycoplasma: São os menores microrganismos de vida livre. Poucos gêneros são de interesse na medicina veterinária. Não apresentam parede celular (logo, não se coram pelo Gram) e exigem meios enriquecidos para o crescimento.

O que são clamídias? São bactérias esféricas, intracelulares obrigatórias e não cultiváveis em meios artificiais. Possuem parede sem peptidoglicano e causam enfermidades nos tratos respiratório, reprodutor e entérico de homens e animais.

Fale sobre as espécies de Chlamydophila:

• Chlamydophila psittaci: Causa doenças em aves (pneumonia, aerossaculite e conjuntivite) e humanos (psitacose, aborto e conjuntivite).
• Chlamydophila abortus: Causa aborto em ovinos, caprinos, suínos e bovinos.
• Chlamydophila felis: Causa conjuntivite em felinos.
• Chlamydophila pneumoniae: Causa infecções respiratórias em humanos e equinos.

Descreva a coloração de Ziehl-Neelsen: É uma técnica de coloração mais agressiva que a de Gram, utilizada para bactérias que coram mal (como micobactérias). O procedimento é:

1. Cobrir a lâmina com fucsina fenicada.
2. Aquecer a lâmina até a emissão de vapores e esperar de 5 a 8 minutos.
3. Lavar com água corrente.
4. Descorar com álcool-ácido.
5. Lavar com água corrente.
6. Cobrir com azul de metileno (contracorante) e lavar.
7. Secar e observar ao microscópio.

Como é feito o teste da coagulase e para que serve? Utilizado para identificar Staphylococcus. Adiciona-se o plasma em uma lâmina ou tubo e mistura-se com a colônia para verificar a formação de coágulos. Geralmente separa o S. aureus (coagulase positivo) das demais espécies (coagulase negativas).

Como diferenciamos Staphylococcus de Streptococcus? A diferenciação é feita pelo teste da catalase. Quando ocorre a formação imediata de bolhas (liberação de O₂), o microrganismo é catalase positivo (Staphylococcus); se não houver formação de bolhas, é catalase negativo (Streptococcus).