Questionário de Microbiologia: Técnicas de Coloração

Questionário de Microbiologia - Coloração

• O que é coloração diferencial? Exemplifique.

R: Corantes diferentes reagem de modos distintos com tipos diferentes de bactérias. As mais comumente usadas são a coloração de Gram e a coloração de Ziehl-Neelsen (para bactérias álcool-ácido resistentes – BAAR, também conhecida como coloração para BK – bacilo de Koch).

• Por que na Coloração de Gram as bactérias Gram-negativas se coram de rosa e as Gram-positivas de roxo?

Porque nas bactérias Gram-negativas, sua parede celular contém uma camada fina de peptidoglicano e possuem uma membrana externa constituída de lipopolissacarídeos, lipoproteínas e fosfolipídeos.

Já as bactérias Gram-positivas, sua parede celular é constituída de muitas camadas de peptidoglicano, formando uma estrutura rígida e espessa, e possuem também ácido teicoico.

• O que é uma coloração especial? Exemplifique.

Corantes especiais são utilizados para corar e isolar partes específicas dos microrganismos, como endósporos ou flagelos, e para revelar a presença de cápsulas. Ex: Coloração negativa para cápsulas, Coloração para endósporos, Coloração de flagelos.

• Em que se baseia a coloração de Gram? Cite exemplos de bactérias que se coram diferentemente por essa coloração.

Na coloração de Gram, as bactérias podem ser classificadas, de acordo com sua parede, em dois grandes grupos: Gram-positivas e Gram-negativas. Sua técnica consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor. Essa coloração é a técnica mais importante utilizada em microbiologia para identificar as bactérias presentes em uma suspensão bacteriana ou em um material contaminado.

• Para auxiliar a identificação de bactérias existem três tipos de coloração. Cite todas elas e explique uma.

1. Coloração simples: Utiliza-se uma solução aquosa ou alcoólica de um único corante básico. Objetivo: destacar todo o microrganismo para que a forma celular e as estruturas básicas fiquem visíveis. Corantes simples: azul de metileno, carbolfucsina, violeta de genciana ou safranina.

2. Colorações Diferenciais: Corantes diferentes reagem de modos distintos com tipos diferentes de bactérias. As mais comumente usadas são a coloração de Gram e a coloração de Ziehl-Neelsen (para bactérias álcool-ácido resistentes – BAAR, também conhecida como coloração para BK – bacilo de Koch).

3. Colorações especiais: Corantes especiais são utilizados para corar e isolar partes específicas dos microrganismos como endósporos ou flagelos, e para revelar a presença de cápsulas.

• Antes de procedermos à coloração do microrganismo na lâmina, o que devemos fazer? Justifique.

Utiliza-se uma solução aquosa ou alcoólica de um único corante básico. Objetivo: destacar todo o microrganismo para que a forma celular e as estruturas básicas fiquem visíveis. Corantes simples: azul de metileno, carbolfucsina, violeta de genciana ou safranina.

• Por que é utilizado o óleo de imersão na microscopia óptica?

O óleo ajuda a manter os raios de luz juntos quando eles passam entre a lâmina e as lentes da objetiva (o índice de refração do óleo e do vidro é o mesmo); isto faz com que a lente forme uma imagem mais clara e detalhada.

• Qual é o aumento final quando é utilizada a objetiva de imersão?

O aumento final é de 1000x.

• Qual a função da fixação após a realização do esfregaço?

Sem a fixação, a coloração poderia lavar os microrganismos da lâmina.

• O que é esfregaço?

Esfregaço: filme delgado de material contendo microrganismos espalhados na superfície da lâmina.

• O que é coloração simples?

Serve apenas para corar o corpo bacteriano e utiliza apenas uma cor.