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MEIOS DE CULTURA

FISIOLOGIA BACTERIANA - O número de Microrganismos vai aumentando e estes se acumulando em colônias

COLONIA: grupos de células que podem Ser visualizados sem a utilização de um microscópio. Centenas ou milhares ou Bilhões de células em curto espaço de tempo .

FISIOLOGIA BACTERIANA: O crescimento e Divisão celulardepende de um Ambiente propício comtodos os Constituintes químicos efísicos Necessários pára o metabolismobacteriano.Essas necessidades são específicaspara cada espécie bacteriana.

Nutrição BACTERIANA: Estruturas Bacterianas são formadas por macromoléculas Precursores das macromoléculas  Meio ambiente  sintetizados pelas bactérias a partir de compostos mais simples Depende da disponibilidade do composto no meio  da capacidade de síntese do Microrganismo.

Nutrição BACTERIANA: NUTRIENTES - substâncias Ou elementos retirados doambiente Usados pára construir novoscomponentes Celulares ou pára produzir energia.

Macronutrientes: - Necessários em Grande quantidade. Papel importante na estrutura e metabolismo.

Micronutrientes: - Necessários em Quantidades mínimas. Funções enzimáticas e estruturais das biomoléculas.

Carbono: Presente na maioria das Substâncias que compõem as células.

Nitrogênio: Elemento mais abundante depois Do C, cerca de 12%. Função do H: Manutenção do Ph Formação de ligações de H Entre moléculas

Nutrientes x Meios de Cultura: Pára Sustentar o crescimentomicrobiano, Um meio deve fornecerfonte de Energia, assim como fontesde carbono, nitrogênio, enxofre,fósforo E quaisquer outros fatoresde Crescimento que o organismo sejaincapaz De sintetizar.

São substâncias ou complexos de substâncias Capazes de dar aós microrganismos os elementos nutritivos necessários ao seu Desenvolvimento. Exigências nutritivas das bactérias variam Existe um grande Número de meios de cultura.

Meios de cultura: Associação Qualitativa e quantitativa de substâncias que fornecem os nutrientes Necessários ao desenvolvimento (cultivo) de microrganismos fora do seu meio Natural.O material nutriente preparado pára o crescimento de microrganismos em Laboratório. Através dele podemos estimular o crescimento de microrganismos Benéficos e aqueles que queremos estudar.

Presença DE NUTRIENTE: Carbono e Nitrogênio são sempre requeridos um meiode culturaOutros minerais são Também necessários mas emquantidades Pequenas (traço)Nem sempre adição é NecessáriaMeios sintéticos com Compostos de alto grau depureza e Água ultra pura podem apresentam deficiências desses elementos.

Meios de cultura: Algumas bactérias Crescem bem em qualquer meio Outras requerem meios especiais Outras ainda não Podem crescer em nenhum meio não vivo.

Características dos meios de cultura: Conter Nutrientes adequados, Conter Quantidade de água suficiente, Ph Apropriado, Nível conveniente de Oxigênio ou talveznenhum, Ser estéril – a cultura conterá Somente osmicrorganismos que foram Introduzidos. A cultura deve ser Incubada em temperatura apropriada. Mesófilos, Termófilos, Psicrófilos

Tipos de meios de cultura: Existe uma Grande variedade de meiosdisponíveis Pára o crescimento demicrorganismos No laboratório (comerciais)A Maioria tem componentespré-misturados E requer somente a adiçãode água e Esterilização. Meios são constantemente desenvolvidos ou atualizados pára Utilização no isolamento e na identificação de bactérias

Agar: Quando se deseja o crescimento Dasbactérias em meio sólido, um Agentesolidificante como o ágar e Adicionado aomeio.O agar tem Propriedades valiosas namicrobiologia, Nunca tendo sido encontrado um substituto satisfatório.

ARACTERISTICAS AGAR: Poucos Microrganismos podem degradar o ágar -permanece sólido. Se liquefaz a 100°C e Permanece líquido até a temperatura diminuir até cerca de 40°C. Pára utilização No laboratório, o agar e mantido em banho-maria a 50°C. Nessa temperatura ele Não destrói a maioria das bactérias.Colocados Em tubos de ensaio ou placas de Petri.

Inclinados: quando a solidificação e Feita com o tubo inclinado rande área de superfície fica disponível pára o crescimento.

Profundo: quando o agar e solidificado Em um tubo mantido na vertical

Placas de Petri: são placas rasas com Uma tampa que as recobre até o fundo

TIPOS DE MEIO DE CULTURA : Meio Quimicamente definido: Aquele cuja composição é Conhecida Ou seja, sabe-se Exatamente seu conteúdo de energia, de nutrientes e de outros fatores de Crescimento

Meio quimicamente definido: Sais, Compostos orgânicospurificados e ÁguaDeve conter muitos fatores decrescimento orgânicos

Meio complexo: Feitos a partir de Extratos de leveduras, de carnes ou de plantas, ou produtos de digestão destas Ou de outras fontes. Utilizam hidrolisados – caseína, carne, soja, levedura A Composição química exata varia um pouco de acordo com o lote.Necessidades de Energia, carbono, nitrogênio e enxofre: fornecidas pelasproteínas.

Meio complexo: Quando apresenta forma Liquida:chamado de caldo nutriente.Quando agar é adicionado a ele:chamado de agar nutriente.

Função DAS SUBSTÂNCIAS:

Extrato de carne: Contém substâncias Que estimulam a atividade bacteriana (fatores de crescimento) e é alimento Plástico, pois vai integrar o protoplasma bacteriano. Fonte de Carbono.

Peptona: É fonte de nitrogênio

Cloreto de sódio – aumenta a pressão Osmótica e mantém a isotonia do meio.

Ágar–agar: É uma substância mucilaginosa Extraída de várias espécies de Gelidium e outras algas afins. Tem somente função De solidificar os meios, não sendo metabolizado pelas bactérias.

Meios Redutores: Pára anaeróbicos que Podem ser mortos pelaexposição ao OxigênioEsses meios contem Ingredientes, como otioglicolato de Sódio, que se combinaquimicamente Com o oxigênio o dissolvendo E o eliminando do meio de cultura.

Pode-se Utilizar uma embalagem de compostos químicos (ácido ascórbico)

Embalagem é Simplesmente aberta pára exposição do produto ao oxigênio na atmosfera da Jarrá.

Placa de Petri se transforma em uma câmara anaeróbica.

O meio da Placa contém uma enzima, a oxirase, que combina o oxigênio com o hidrogênio, Removendo o oxigênio a medida que é água e formada.

Câmara Anaeróbica preenchida com gases inertes (geralmente cerca de 85% N2, 10% H2 e 5% CO2).

Classificação dos meios de cultura: Sólidos  contêm agentes solidificantes, principalmente ágar (cerca de 1 a 2,0 %) semi-sólidos  quando a quantidade de ágar é de 0,075 a 0,5 %, dando uma Consistência intermediária

Classificação: Quanto aós componentes Nutricionais:

Básicos – Permitem o crescimento Bacteriano, sem satisfazer nenhuma exigência característica de algum Microrganismo.

Especiais – Cumprem as exigências Vitais de determinados microrganismos. Geralmente são adicionados sangue, soró Ou com outros nutrientes.

Classificação quanto a finalidade: Meios De pré-enriquecimentosão aqueles Que permitem adessensibilização de Microrganismosinjuriados, EstressadosPara amostras que Sofreram algum tipo detratamento (térmico ou químico).

Meios de enriquecimento: proporcionam Crescimento de microrganismos presentes em baixos números ou de crescimento Lento, bem como microrganismos exigentes e fastidiosos.

Classificação quanto a finalidade Meios Diferenciais:  apresentam substâncias Que permitem diferenciar microrganismos muito parecidos.

Classificação quanto a finalidade: Meios Seletivo  contêm substâncias que inibem odesenvolvimento de determinadosgrupos de microrganismos, permitindoo crescimento de outros.

Meio seletivo: Ex: ágar Sabouraud Dextrose, pH 5,6, é utilizado no crescimento de fungos que são favorecidos, em Relação as bactérias, pelo baixo pH.

Meio indicador: facilita a Identificação de um determinado organismo. Meio ágar-sangue, utilizado pára a Identificação de bactérias capazes de destruir células sangüíneas (anel claro Em torno da colônia).

Meio de manutenção: Estocagem ou Manutenção – utilizadospara Conservação de microrganismos nolaboratório

Ex: ágar Conservação, Meios com leite, Ágar suco de tomate, Ágar Simples, meio semi-sólido, etc.

Etapas na preparação do meio: Pesar as Substâncias,Juntar a água,Deixar dissolver,Autoclavar

Esterilização: É feita a 121ºC durante 15 minutos a 1 atmosfera de pressão (autoclave). Deixar esfriar a 50ºc e Distribuir assepticamente em placas de Petri.

PROVA DE ESTERILIDADE: Os meios após a Esterilização serão colocados na estufa de crescimento a 37ºc, durante 24h, Pára comprovação da esterilidade.

Definições: Inóculo: são os Microorganismosintroduzidos em um Meio de culturapara iniciar o Crescimento.

Cultura: quando os microrganismoscrescem e se multiplicam dentro ousobre um meio de cultura.