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Guia de Microbiologia: Estruturas e Identificação Bacteriana

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Guia de Microbiologia: Estruturas e Identificação Bacteriana

Estruturas Internas e Externas à Parede Celular

Glicocálix: Circunda a célula; apresenta-se como cápsula e camada viscosa. Utiliza-se coloração negativa (cora tudo menos a cápsula). Função: Proteção contra a fagocitose e relacionado à virulência (fixação).

Estruturas externas à parede celular - Flagelo: Origem no citoplasma e estende-se até o exterior. Composto de flagelina, alça ou gancho preso à parede celular e membrana plasmática. Função: Motilidade. Dividido em: monotríquio, anfitríquio, lofotríquio e peritríquio.

Filamentos Axiais e Endoflagelos: Meio de locomoção das espiroquetas; localização entre a parede celular e a bainha externa.

Fímbrias (pelos curtos): Compostas pela proteína pilina; são numerosas e têm como função a adesão à superfície.

Pili (mais longo que as fímbrias): Composto pela proteína pilina; serve para a transferência de material genético.

Estruturas internas à parede celular:

  • Membrana Plasmática: Composta por fosfolipídeos e proteínas. Função: Barreira seletiva, digestão de nutrientes e produção de energia.
  • Mesossomos: Cristas; envolvidos em difusão simples, facilitada, osmose, transporte ativo e translocação de grupo.
  • Lise osmótica: Incha até romper; Plasmólise: Perde água.
  • Citoplasma: Composto por 80% de água, enzimas, carboidratos, lipídeos e íons.
  • Nucleoide: DNA circular, dupla fita. O cromossomo não possui histonas nem envelope nuclear.
  • Plasmídeo: Fragmento extracromossômico de DNA dupla fita circular; confere vantagens como resistência a antibióticos, tolerância a metais tóxicos e replicação independente.
  • Ribossomo: Síntese proteica.

Inclusões (Reserva):

  • Grânulos metacromáticos: PO4 inorgânico, usado na síntese de ATP.
  • Grânulos de polissacarídeos: Glicogênio (marrom) e amido (azul), identificados por coloração de iodo.
  • Inclusões lipídicas: Poli-beta-hidroxibutírico.
  • Grânulos de enxofre: Thiobacillus.
  • Vacúolos de gás: Função de manter flutuação, receber luz e nutrientes.

Endósporo: Presente em Bacillus e Clostridium; importante na indústria de alimentos; processos de esporulação e germinação.

Componentes da Parede Celular

Gram-positivas (+): Muitas camadas de peptidioglicano (espessa e rígida). Possui ácidos teicoicos (regulam movimentos de cátions, impedem a ruptura externa da parede/lise celular e fornecem especificidade antigênica). Lipoteicoicos: Atravessam a parede; Teicoicos: Ficam somente na parede.

Gram-negativas (-): Uma ou duas camadas de peptidioglicano dentro do espaço periplasmático. Não contém ácidos teicoicos. A membrana externa é uma barreira para certos antibióticos. Possui porinas (passagem de aminoácidos, peptídeos, local para substâncias de vírus e substâncias nocivas) e LPS (lipopolissacarídeos): Polissacarídeo O e Lipídeo A.

Bactérias sem Parede Celular: Mycoplasma e Ureaplasma. São as menores conhecidas; únicas que possuem esteróis; pleomórficas; produzem filamentos parecidos com fungos.

Métodos de Coloração

Coloração de Gram

Classificação com base na morfologia e na reação à coloração:

  • Gram-positivas: Parede celular espessa de peptidioglicano e ácido teicoico; retém o corante Violeta Genciana (Roxa).
  • Gram-negativas: Parede celular com camada delgada de peptidioglicano; descoloração do cristal violeta com álcool-acetona e posterior coloração com corante de fundo (Fucsina/Rosa).

Procedimento: Preparo do esfregaço → Fixar no calor → Violeta Genciana (1 min) → Lavar → Lugol (1 min) → Lavar → Álcool-acetona (descoloramento) → Lavar → Fucsina ou Safranina (30 seg) → Lavar e secar.

Coloração de Ziehl-Neelsen

Utilizada para identificar BAAR (Bactérias Álcool-Ácido Resistentes), como as da tuberculose.

Procedimento: Esfregaço (parte purulenta) → Fixar no fogo → Cobrir com fucsina fenicada → Aquecer até a emissão de vapores (sem ferver) por 5 a 8 min → Lavar → Álcool-ácido 3% até descorar → Lavar → Azul de metileno (1 min) → Lavar → Secar → Objetiva de imersão 100x.

Resultados: BAAR (vermelho); BNAAR (azul).

Meios de Cultura e Identificação

Tipos de Meios:

  • Isolamento/Seleção: MacConkey, Azida.
  • Enriquecidos: Ágar Sangue, Ágar Chocolate, Selenito.
  • Identificação: TSI, Lisina (série bioquímica).
  • Transporte: Cary e Blair, Stuart (não nutritivos, mantêm umidade, pH e atmosfera).

Identificação de Bacilos Gram-Negativos

Família Enterobacteriaceae; identificados pelo perfil metabólico (provas bioquímicas) e sorológicas.

Identificação de Cocos Gram-Positivos

Diferenciação entre Staphylococcus (agrupados em cachos, catalase positiva) e Streptococcus (cadeia curta ou longa, catalase negativa).

Identificação de Staphylococcus:

  • Prova da Coagulase: Positiva para Staphylococcus aureus; negativa para demais espécies.
  • Prova do Manitol: Fermentação do manitol (degradação aeróbia) indica S. aureus.

Identificação de Streptococcus sp. (Hemólise):

  • Alfa (parcial): Eritrócitos não totalmente lisados.
  • Beta (total): Hemólise completa.
  • Gama (anemolítica): Sem ação hemolítica.

Classificação de Lancefield (Hemólise):

  • Grupo A: Beta-hemolítico (S. pyogenes).
  • Grupo B: Beta-hemolítico (S. agalactiae).
  • Grupo C: Beta-hemolítico (S. equi).
  • Grupo D: Hemólise variável (Enterococcus sp.).
  • Grupo G: Beta-hemolítico (S. canis).

Microbiota Normal

Patógenos Estritos: Sempre associados a doenças (ex: Neisseria gonorrhoeae).
Patógenos Oportunistas: Micro-organismos da microbiota normal (ex: Staphylococcus aureus).

Pele: Local hostil. Comum: Staphylococcus coagulase-negativa, Corynebacterium, Propionibacterium, Acinetobacter, Bacillus, Candida, Malassezia.

Cavidade Oral e Vias Aéreas: 10 a 100 anaeróbios para cada aeróbio. Exemplos: Actinomyces, Haemophilus, Neisseria, Streptococcus, Candida, Entamoeba.

Ouvido e Olho: Colonizados principalmente por Staphylococcus coagulase-negativa. Patógenos oculares: S. pneumoniae, S. aureus, H. influenzae, N. gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, P. aeruginosa e Bacillus cereus.

Trato Gastrointestinal:

  • Esôfago: Candida spp., Herpes simples, CMV.
  • Estômago: Lactobacillus, Streptococcus, Helicobacter pylori.
  • Intestino Delgado: Anaeróbios (Peptostreptococcus, Porphyromonas).
  • Intestino Grosso: Maior concentração (1011 bactérias/g de fezes). E. coli, Bifidobacterium, Bacteroides, Enterococcus.

Sistema Geniturinário:

  • Uretra Anterior: Lactobacillus, Streptococcus, Staphylococcus coagulase-negativa.
  • Vagina: Influência hormonal. Lactobacillus, Staphylococcus. O muco cervical contém lisozimas.

Patologias Específicas

  • Infecções Urinárias: Causadas por Gram-negativas (Escherichia coli) e Gram-positivas (Staphylococcus saprophyticus).
  • Bartolinite: N. gonorrhoeae e C. trachomatis.
  • Cervicite: N. gonorrhoeae, Herpes, C. trachomatis. Diagnóstico: Thayer-Martin.
  • Salpingite: Inflamação das trompas de Falópio.
  • Prostatite e Epididimite: E. coli e C. trachomatis.
  • Sífilis: Treponema pallidum (espiroqueta).

Resumo de Patologias: Rinite (Staphylococcus); Febre Reumática e Faringite (Streptococcus); ITU (Staphylococcus).

Resumo de Meios e Testes

  • Ágar Manitol: Seletivo para Staphylococcus aureus (Gram+).
  • Ágar Sangue: Nutritivo, cresce quase tudo.
  • Ágar Sangue Azida: Seletivo para Gram-positivas.
  • Ágar Chocolate: Sangue hemolisado, seletivo para Neisseria sp.
  • Ágar MacConkey: Seletivo para Gram-negativas (E. coli, Salmonella, Klebsiella).

Exercícios de Revisão

1. Parede celular: Somente a I está correta (Gram+ tem muitas camadas de peptidioglicano).
2. Coloração de Gram: Somente a I está correta (Violeta cora todas de roxo inicialmente).
3. Atmosfera: I e III estão corretas (Aeróbio precisa de O2; Anaeróbios facultativos crescem com ou sem O2).
4. Esporos: EXCETO (c) Podem ser mortos por aquecimento a 120ºC por 15 minutos (correto seria autoclave).
5. Flora normal: EXCETO E. coli é predominante na garganta (é no intestino).
6. Coloração de Gram: EXCETO Mycoplasma pneumoniae é visível (não é visível pois não tem parede).
7. ITU: EXCETO Mycobacterium tuberculosis.
8. Imunoglobulinas: A(V), B(F), C(V), D(F), E(V).
9. Parasitas: Ascaris spp. (ingestão de ovos); Trypanosoma cruzi (contato com fezes de barbeiro).
10. ITU: EXCETO Ascaris lumbricoides.
11. Vírus: Nenhuma das afirmativas está correta.

S. pyogenes: Causa faringite bacteriana e febre reumática. Tratamento prolongado, comum em jovens.

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